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大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选
刘婕1; 陈俊亨1,2; 徐天殊1,2; 王丽萍2; 赵琦1
2014
Source Publication中国医药生物技术
ISSN1673-713X
Volume9Issue:4Pages:273-277
Abstract

目的:构建大容量人源 Fab 噬菌体库,筛选并鉴定抗CD276的特异性抗体。

方法:通过采集10位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用 RT-PCR 扩增人 Fab 抗体基因片段,插入噬菌体载体 pCANTAB5H 中,构建人源 Fab 噬菌体抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,随机挑取96个单克隆进行 phage-ELISA 鉴定,筛选出与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。

结果:成功构建库容为5×1010的噬菌体抗体库,从中筛选到11株阳性克隆,对其进行测序鉴定,表明该11株克隆的序列均一致,ELISA 证实其对抗原 CD276具有较强的结合性。

结论:构建了大容量人源 Fab 抗体库,从中获得具有抗CD276的人源 Fab 抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。

Keyword免疫球蛋白 Fab 片段 噬菌体展示抗体库 Cd276
DOIhttps://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2014.04.005
Language中文
Fulltext Access
Citation statistics
Document TypeJournal article
CollectionFaculty of Health Sciences
Affiliation1.518055 深圳,中国科学院深圳先进技术研究院抗体药物研究中心
2.130012 长春,吉林大学生命科学学院
Recommended Citation
GB/T 7714
刘婕,陈俊亨,徐天殊,等. 大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选[J]. 中国医药生物技术,2014,9(4):273-277.
APA 刘婕,陈俊亨,徐天殊,王丽萍,&赵琦.(2014).大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选.中国医药生物技术,9(4),273-277.
MLA 刘婕,et al."大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选".中国医药生物技术 9.4(2014):273-277.
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